פּקר, אָדער פּאָלימעראַסע קייט רעאַקציע, איז אַ טעכניק געניצט צו אַמפּלאַפיי דנאַ סיקוואַנסיז.עס איז געווען ערשטער דעוועלאָפּעד אין די 1980 ס דורך קאַרי מולליס, וואָס איז געווען אַוואָרדיד די נאָבעל פרייז אין כעמיע אין 1993 פֿאַר זיין אַרבעט.PCR האט רעוואַלושאַנייזד מאָלעקולאַר ביאָלאָגי, אַלאַוינג ריסערטשערז צו פאַרגרעסערן דנאַ פון קליין סאַמפּאַלז און לערנען עס אין דעטאַל.
פּקר איז אַ דריי-שריט פּראָצעס וואָס נעמט אָרט אין אַ טערמאַל סייקאַלער, אַ מאַשין וואָס קענען געשווינד טוישן די טעמפּעראַטור פון אַ אָפּרוף געמיש.די דריי סטעפּס זענען דענאַטוראַטיאָן, אַנילינג און פאַרלענגערונג.
אין דער ערשטער שריט, דינאַטוראַטיאָן, די טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ איז העאַטעד צו אַ הויך טעמפּעראַטור (געווענליך אַרום 95 ° C) צו ברעכן די הידראָגען קייטן וואָס האַלטן די צוויי סטראַנדז צוזאַמען.דעם רעזולטאַט אין צוויי איין-סטראַנדיד דנאַ מאַלאַקיולז.
אין די רגע שריט, אַנילינג, די טעמפּעראַטור איז לאָוערד צו אַרום 55 ° C צו לאָזן די פּרימערז צו אַנילינג די קאַמפּלאַמענטשי סיקוואַנסיז אויף די איין-סטראַנדיד דנאַ.פּרימערז זענען קורץ שטיק פון דנאַ וואָס זענען דיזיינד צו גלייַכן די סיקוואַנסיז פון אינטערעס אויף די ציל דנאַ.
אין די דריט שריט, פאַרלענגערונג, די טעמפּעראַטור איז אויפגעשטאנען צו אַרום 72 ° C צו לאָזן די טאַק פּאָלימעראַסע (אַ טיפּ פון דנאַ פּאָלימעראַסע) צו סינטאַסייז אַ נייַ שנירל פון דנאַ פֿון די אָנפאַנגערס.די טאַק פּאָלימעראַסע איז דערייווד פון אַ באַקטיריאַ וואָס לעבט אין הייס ספּרינגס און איז ביכולת צו וויטסטאַנד די הויך טעמפּעראַטורעס געניצט אין פּקר.
נאָך איין ציקל פון פּקר, דער רעזולטאַט איז צוויי עקזעמפלארן פון די ציל דנאַ סיקוואַנס.דורך ריפּיטינג די דריי סטעפּס פֿאַר אַ נומער פון סייקאַלז (טיפּיקלי 30-40), די נומער פון עקזעמפלארן פון די ציל דנאַ סיקוואַנס קענען זיין געוואקסן עקספּאָונענשאַלי.דעם מיטל אַז אפילו אַ קליינטשיק סומע פון סטאַרטינג דנאַ קענען זיין אַמפּלאַפייד צו פּראָדוצירן מיליאַנז אָדער אפילו ביליאַנז פון עקזעמפלארן.
PCR האט פילע אַפּלאַקיישאַנז אין פאָרשונג און דיאַגנאָסטיקס.עס איז געניצט אין דזשאַנעטיקס צו לערנען די פאַנגקשאַנז פון גענעס און מיוטיישאַנז, אין פאָרענסיקס צו פונאַנדערקלייַבן דנאַ זאָגן, אין דיאַגנאָסיס פון ינפעקטיאָוס קרענק צו דעטעקט דעם בייַזייַן פון פּאַטאַדזשאַנז, און אין פּרענאַטאַל דיאַגנאָסיס צו פאַרשטעלן פֿאַר גענעטיק דיסאָרדערס אין פיטאַסאַז.
פּקר איז אויך צוגעפאסט צו נוצן אין אַ נומער פון ווערייישאַנז, אַזאַ ווי קוואַנטיטאַטיווע פּקר (קפּקר), וואָס אַלאַוז די סומע פון דנאַ צו זיין געמאסטן און פאַרקערט טראַנסקריפּציע פּקר (רט-פּקר), וואָס קענען ווערן גענוצט צו פאַרגרעסערן רנאַ סיקוואַנסיז.
טראָץ זייַן פילע אַפּלאַקיישאַנז, PCR האט לימיטיישאַנז.עס ריקווייערז וויסן פון די ציל סיקוואַנס און די פּלאַן פון צונעמען אָנפאַנגערס, און עס קען זיין פּראָנע צו טעות אויב די אָפּרוף טנאָים זענען נישט אָפּטימיזעד ריכטיק.אָבער, מיט אָפּגעהיט יקספּערמענאַל פּלאַן און דורכפירונג, PCR בלייבט איינער פון די מערסט שטאַרק מכשירים אין מאָלעקולאַר ביאָלאָגי.
פּאָסטן צייט: פעברואר 22-2023